Среда A+B (Sueoka) для Chlamydomonas модифицированная

Состав среды:

Реактив	в 1 л твердой среды (A+B)	в 1 л жидкой среды (5A+2B)
NH₄Cl (г)	0,05	0,25
MgSO₄x7H₂O (г)	0,02	0,1
CaCl₂x2H₂O (г)	0,01	0,05
K₂HPO₄ (x3H₂O) (г)	0,72 (0,94)	1,44 (1,89)
KH₂PO₄ (г)	0,36	0,72
Микроэлементы 1 (мл)	1	1
Микроэлементы 2 (мл)	1	1
Fe+ЭДТА (мл)	1	1
Агар (г)	18	-

Рекомендации по приготовлению среды:

Среда готовится из стоковых растворов по следующей прописи:

Раствор	в 1 л твердой среды (A+B)	в 1 л жидкой среды (5A+2B)
А (мл)	10	50
B (мл)	50	100
Микроэлементы 1 (мл)	1	1
Микроэлементы 2 (мл)	1	1
Fe+ЭДТА	1	1
Агар (г)	18	-

Растворы добавляются в700 мл дистиллированной воды, затем объем доводится до 1 л.

Раствор A:

Реактив	г, на 1 л
NH₄Cl	5
MgSO₄x7H₂O	2
CaCl₂x2H₂O	1

Раствор В (Фосфатный буфер):

Реактив	г, на 1 л
K₂HPO₄ (x3H₂O)	14,4 (18,87)
KH₂PO₄	7,2

Приготовление специального раствора FeSO₄ и ЭДТА:

В 134 мл 1N KOH растворить 30,2 г EDTA. Раствор разбавить водой, внести 24,9 г FeSO₄*7H₂O и долить водой до 1 литра. Продуть раствор воздухом без CO₂ в темноте в течение 12 часов. Чтобы избавиться от СО₂, воздух должен пройти через раствор щелочи.

Прописи для растворов микроэлементов в граммах на литр :

Раствор микроэлементов 1*:

H₃BO₃	2,86
MnCl₂×4H₂O	1,81
ZnSO₄×7H₂O	0,22
CuSO₄×5H₂O	0,08
MoO₃	0,015

Раствор микроэлементов 2*:

NH₄VO₃	0,023
K₂Cr₂ (SO₄)₄×24H₂O	0,096
NiSO₄×7H₂O	0,048
Na₂WO₄×2H₂O	0,018
Ti₂(SO₄)₃	0,040
Co(NO₃)₂×6H₂O	0,044

*Можно вместо этих двух растворов использовать раствор микроэлементов как для среды Тамия или Hunters для среды TAP (в концентрации 1 мл/л).

Источники:

Sueoka N. Mitotic replication of deoxyribonucleic acid in Chlamydomonas reinhardi // PNAS 1960 v. 46(1) p. 83–91

Владимирова М.Г., Барцевич Е.Д., Жолдаков И.А., Епифанова О.О., Маркелова А.Г., Маслова И.П., Купцова Е.С. IPPAS - коллекция культур микроводорослей Института физиологии растений им. К.А. Тимирязева АН СССР // В кн. Каталог культур коллекций СССР, М., (1991) с. 8 - 61