Среда Аллен с глюкозой, модификация Сенцовой

Раствор солей в граммах на 500 мл:

Реактив: Масса, г/л
(NH4)2SO4 1,32
KH2PO4 0,27
MgSO4×7H2O 0,25
CaCl2×2H2O 0,074
FeSO4×7H2O* 0,02
раствор микроэлементов  1,0 мл
вода дистиллированная 1 литр
агар-агар 20,0

* можно использовать раствор Fe+ЭДТА в концентрации 1мл/л 

         pH доводится до 2-3 H2SO

Раствор глюкозы в граммах на 500 мл:

Реактив:Масса, г/л
глюкоза1,0
агар-агар20

Агар с глюкозой автоклавируется отдельно, в объеме 0,5 л с дистилированной водой. Если готовится жидкая среда, то глюкоза все равно стерилизуется отдельно и растворы смешиваются после автоклавирования.

После автоклавирования теплые (не горячие!) растворы сливаются в одну колбу, полученная среда тщательно перемешивается, необходимо разлить по чашкам или пробирку сразу весь объем. Повторно плавить эту среду нельзя, так при таком низком pH агар при нагревании гидролизуется.

Приготовление специального раствора FeSO4 и ЭДТА:

В 134 мл 1N KOH растворить 30,2 г EDTA. Раствор разбавить водой, внести 24,9 г FeSO4*7H2O и долить водой до 1 литра. Продуть раствор воздухом без CO2 в темноте в течение 12 часов. Чтобы избавиться от СО2, воздух должен пройти через раствор щелочи.

Пропись для раствора микроэлементов (в г/л):

    H3BO3     2,86
    MnCl2×4H2O     1,81
    ZnSO4×7H2O     0,222
    MoO3     0,018
    NH4VO3     0,023

Дистиллированная вода до 1 л.

Источники:

Allen M.B. Studies with Cyanidium caldarium, an annormaly pigmented Chlorophyta // Arch.Microbiol. 1959. v.32. p.270

Сенцова О.Ю., Кравцова Т.Р., Гусев М.В. Физиолого-биохимические особенности ацидотермофильных водорослей Cyanidium coldarium и Galdieria sulfuraria и их рост при совместном культивировании в фотоавтотрофных, миксотрофных и гетеротрофных условиях // Физиология растений. 1988. Т.35. Вып.3. С.516 - 525

Владимирова М.Г., Барцевич Е.Д., Жолдаков И.А., Епифанова О.О., Маркелова А.Г., Маслова И.П., Купцова Е.С. IPPAS - коллекция культур микроводорослей Института физиологии растений им. К.А. Тимирязева АН СССР // В кн. Каталог культур коллекций СССР, М., (1991) с. 8 - 61