Состав на 1 л готовой среды:
Раствор солей в граммах на 500 мл дистиллированнной воды:
| Реактив | масса, г |
| NaCl | 0,1 |
| (NH4)2SO4 | 1,0 |
| MgSO4Ч7H2O | 0,4 |
| KH2PO4 | 0,4 |
| CaCl2 (10 %) | 0,066 |
| L – глутаминовая кислота | 2,0 |
| FeCl3 (1 %) | 1 мл |
| раствор микроэлементов 1 | 1 мл |
| раствор микроэлементов 2 | 1мл |
| Раствор с витаминами для среды F* | 1 мл |
Для приготовления 1 л агаризованной среды раствор солей готовится и
автоклавируется отдельно в 500 мл дистиллированной воды, 18 г агара – отдельно
также в 500 мл дистилированной воды. После охлаждения до 50-60 °С раствор солей
и агар сливают, добавляют витамины.
Прописи для
растворов микроэлементов в граммах на литр :
Раствор
микроэлементов 1:
| H3BO3 | 2,86 |
| MnCl2Ч4H2O | 1,81 |
| ZnSO4Ч7H2O | 0,22 |
| CuSO4Ч5H2O | 0,08 |
| MoO3 | 0,015 |
Раствор микроэлементов 2:
| NH4VO3 | 0,023 |
| K2Cr2 (SO4)4Ч24H2O | 0,096 |
| NiSO4Ч7H2O | 0,048 |
| Na2WO4Ч2H2O | 0,018 |
| Ti2(SO4)3 | 0,040 |
| Co(NO3)2ґ6H2O | 0,044 |
Раствор с витаминами
для среды F (100 мл)
Добавить к 60 мл деионизированной воды mQ
|
Реактив |
количество |
Концентрация
в исходном растворе, г/л деионизированной воды mQ |
|
Тиамин HCl (витамин
В1) |
40 мг |
- |
|
Биотин |
1 мл |
0,1 |
|
Витамин В12 |
1мл |
0,1 |
Довести объем водой до 100 мл. Для получения стерильного раствора
профильтровать через 0,2 мкм фильтр в стерильном ламинаре в стерильные 15 мл
пробирки с завинчивающейся крышкой . Одну пробирку оставить для использования
(хранить при +4°С в темноте), остальные хранить при -20°С.